【摘要】 目的］用高效液相色谱法测定十三味马钱子丸士的宁的含量。［方法］采用hyperclone bds c18柱（250×4.6mm，5um）；流动相为乙腈0.01mol/l庚烷磺酸钠与0.02mol/l磷酸二氢钾等量混合溶液（用10%磷酸调节ph值为2.8）（21:79）；流速1.0ml/min；检测波长260nm；柱温30℃。［结果］士的宁浓度的线性范围为7.382～366.4μg/ml，r=0.9996，回收率为98.74%（rsd=0.6%）。［结论］本法方便、快速、准确，可用于十三味马钱子丸的质量控制。
【关键词】 十三味马钱子丸；士的宁；高效液相色谱法； 含量测定
measure 13 vomic-nuts strychnin content with hplc
ding hongxian
tcm hospital of yiwu city,zhejiang province（322000）
abstract：［objective］to measure the strychnin content in 13 vomicnuts with hplc.［method］take the mixed solution of hyperclone bds c18 column（250×4.6mm，5um）,flow phase：acetonitrile-0.01mol/l heptane sodium sulfonate and equal 0.02mol/l patossium dihydrogen phosphate（with 10% phosphoric acid for adjustment,ph being 2.8）（21:79）；the flow speed:1.0ml/min；measured wavelength：260nm；column temperature：30℃.［result］the strychnin concentration is in the linear range of 7.382～366.4μg/ml，r=0.9996，the reclaim rate is 98.74%（rsd=0.6%）.［conclusion］the method is easy,quick and correct,can be used for quality control of 13 vomicnuts strychnin.
key words：13 vomicnuts;strychnine;hplc;content measurement
十三味马钱子丸具有行气，降血压，化瘀止痛的功效，用于治疗气血上壅的高血压，胸背疼痛，呼吸困难，头晕，耳鸣，牙龈红肿，“冈巴”病亢盛等。士的宁为马钱子中的主要毒性成分，应对其含量进行控制，原标准［1］无控制指标。为了更好的控制该药的质量，本文用hplc法测定样品中士的宁的含量。
1 仪器与试药
agilent1200型高效液相色谱仪；乙腈为色谱纯；其它试剂均为分析纯。士的宁对照品购自中国药品生物制品检定所，批号705-9004，供含量测定用。十三味马钱子丸为市售，产地西藏（批号080814，081101，081212）。
2 方法与结果
2.1 色谱条件［2］ 色谱柱：hyperclone bds c18（250×4.6mm，5um）；流动相：乙腈0.01mol/l庚烷磺酸钠与0.02mol/l磷酸二氢钾等量混合溶液（用10%磷酸调节ph值为2.8）（21:79）［2］；流速1.0ml/min；检测波长260nm；柱温30℃。此条件下士的宁与其它组分能达到基线分离，且阴性对照试验无干扰，见图1。
a对照品b十三味马钱子丸c阴性对照
图1 十三味马钱子丸高效液相色谱图（略）
2.2 对照品溶液制备 精密称取士的宁对照品18.32mg，置于50ml量瓶中，加三氯甲烷使溶解，并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。
2.3 供试品溶液的制备 取供试品（平均丸重为0.4103g）剪碎，取约0.4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加氢氧化钠试液2ml，混匀，放置30min，精密加入三氯甲烷20ml，密塞，称定重量，置水浴中加热加流2h，放冷，再称定重量，用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀，通过铺有无水硫酸钠的滤纸滤过，精密量取续滤液10ml，置分液漏斗中，用1%硫酸溶液振摇提取5次，合并酸液，用30%氢氧化钠试液调节ph值为10～11，用三氯甲烷振摇提取5次（10、10、5、5、5ml），合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇溶解并稀释至10.0ml，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.4 阴性样品液的制备 取处方中除马钱子粉外的其他药味，按十三味马钱子丸制备方法制成阴性样品，取约0.4g，按2.3制备方法同法制备。
2.5 线性关系的考察 分别精密量取对照品贮备液0.2、1.0、2.0、4.0、8.0、10.0ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，在上述色谱条件，进样5ul，测定峰面积，以峰面积积分值为纵坐标，士的宁的浓度为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：y=2.68x+11.029，r=0.9996，表明士的宁的浓度在7.328～366.4μg/ml范围内具有良好线性关系。
2.6 重复性试验 精密称取同一批号（080814）的十三味马钱子丸样品6份，分别按供试溶液制备方法制成供试品溶液，测定其士的宁的含量，其rsd为1.97%，说明此方法重复性良好。
2.7 稳定性试验 精密吸取供试品溶液，按上述色谱条件分别于0、2、4、8、16、32、48h分别进样5ul，测得其平均峰面积值的rsd为1.56%，表明供试品溶液中的士的宁在48h小时内是稳定的。
2.8 回收率试验 精密称取已知含量（含士的宁0.9166mg/丸）的十三味马钱子丸，精密添加不同量的士的宁对照品，按供试溶液制备方法及上述色谱条件分别进5ul,记录色谱图，计算回收率为98.74%，rsd=0.6%，结果表明本法回收率好，方法可行。
2.9 样品测定 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,按上述色谱条件测定，记录色谱图，按外标法计算3批样品中士的宁的含量，结果见表1。
表1 样品测定表（略）
3 讨论
本文用hplc法测定样品中士的宁的含量，线性关系的测定、回收试验、溶液稳定性试验和重复性试验等实验结果显示，方法的重现性好，测定结果准确。
【参考文献】
［1］ 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部颁藏药品标准［s］.北京：工业出版社，1995:191.
［2］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典［s］.北京:化学工业出版社,2005:641.
