【关键词】  病毒基因  检测
        一  乙型肝炎病毒dna(hbv-dna)测定
        乙型肝炎是由乙肝病毒引起的以肝脏损害为主要临床特征的急、慢性传染病，严重者可发展成慢性肝炎、肝硬化和肝癌。在我国，乙肝是危害人类健康的一种主要传染病。
        【参考值】
        阴性  (taqman荧光定量pcr技术)
        【临床意义】   
        1.hbv-dna是乙型肝炎病毒感染的直接证据，是hbv有活性复制能力及具传染性的确切标志。
        2.可定量检测hbv-dna含量，为临床病情判断、疗效观察提供信息。
        3.hbv-dna的出现先于其他血清学指标(如hbsag)，可早期诊断hbv感染。
        4.正常人hbv-dna为阴性。当hbv-dna为101～104拷贝/ml时，表明病毒复制水平低，传染性较弱；而当 hbv-dna>104拷贝/ml时，表明病毒复制水平高，传染性强。
        5.hbv-dna含量测定可为临床药物选择提供依据。
        【注意事项】   
        1.标本可用血清或血浆，避免肝素抗凝，避免反复冻融。
        2.标本室温放置不超过4小时。
        3.溶血、高胆红素标本影响检测结果。   
        二  其他病毒dna测定
        (一)人乳头瘤病毒dna(hpv-dna)检查
人乳头瘤病毒是一种小的双链dna病毒，根据核酸相关性分型已发现70余型。该病毒可以感染人的皮肤和黏摸上皮细胞，诱发细胞增生，产生乳头瘤样病变。
        【参考值】   
        阴性  (多重核酸荧光定量pcr技术)
        【临床意义】   
        1.hpv难以用传统的病毒培养及血清学技术检测，目前主要采用分子生物技术检测hpv-dna，灵敏度高。
        2.可对尿道、阴道、宫颈脱落细胞进行人乳头瘤病毒的检测及分型，判断体内hpv感染状况。
        3.hpv 6和11型与尖锐湿疣、喉头鳞状上皮乳头状瘤发生有关；hpv 16、18、31、32型等与宫颈癌发生相关。因此，可用于对hpv高危亚型的诊断，对尖锐湿疣、宫颈癌等疾病的诊断与筛查具有重要意义。
        4.hpv-dna检测可用于考核疗效与预后。
        【注意事项】   
        1.用无菌拭子取尿道、阴道、宫颈分泌物于无菌试管或无菌瓶中。
        2.标本采集应严格按无菌操作，避免污染。并及时送检。
        (二)人类巨细胞病毒dna(hcmv-dna)检查
        hcmv是疱疹病毒科成员，人类普遍易感，多为隐性或潜伏感染。在免疫功能低下、缺陷或抑制情况下，可发生成人hcmv感染，常呈弥漫性病变，严重者甚至死亡。
        【参考值】   
        阴性  (荧光探针杂交pcr技术)
        【临床意义】   
        1.用于临床hcmv感染的快速诊断。
        2.用于临床免疫抑制治疗过程中体内hcmv感染的快速诊断与疗效监测。获得性免疫缺陷综合征等患者hcmv感染的诊断与疗效监测。
        3.pcr技术检测hcmv的敏感性高，且hcmv-dna的出现早于临床症状或血清学标记物的出现，可早期诊断 hcmv感染。
        4.妊娠早期感染hcmv可引起胎儿先天畸形，产前检测hcmv-dna有利于优生优育。
        5.连续监测巨细胞病毒的含量变化可了解病毒的复制状况，从而为疾病的早期诊断与药物疗效提供直接的病原学依据。
        【注意事项】    
        采用edta抗凝全血或脑脊液标本，采集后及时送检。
        (三)单纯疱疹病毒dna(simplex herpes virus， hsv-dna)
单纯疱疹病毒是一种有囊膜的双股dna病毒，分为i型和ii型。近年来，hsv是性传播疾病、病毒性脑炎等疾病的重要病原体。
        【参考值】   
        阴性  (荧光探针pcr技术)
        【临床意义】   
        1.用于检测人血清样本或体液样本中的单纯疱疹病毒并可同时分型，辅助诊断hsv感染性疾病。
        2.hsv  i型感染主要引起口唇疱疹、疱疹性结膜炎、脑炎和皮肤性疱疹，hsv ii型主要引起生殖器疱疹， hsv-dna检测可辅助诊断上述疾病，并可用于考核疗效与预后。

        【注意事项】   
        1.血清用无菌注射针头抽取静脉血2ml于无菌肝功管中。
        2.分泌物用无菌棉拭子采集标本，女性取宫颈或阴道分泌物，男性取精液或前列腺液，将取样后的棉拭子放入无菌试管或无菌瓶中。 
        3.脑脊液抽取脑脊液于无菌玻璃瓶中。
        (四)eb病毒dna(eb virus，ebv-dna)
        ebv属于丫疱疹病毒科，主要经涎液传播，pcr技术可灵敏地检测出标本中的ebv-dna，满足临床诊断、治疗需要。
        【参考值】   
        阴性  (荧光探针杂交pcr技术)
        【临床意义】   
        1.可快速检测血液、脑脊液、组织、尿液中的eb病毒，为eb病毒感染提供直接证据。
        2.eb病毒临床上与鼻咽癌传染性单核细胞增多症、霍奇金病等的发病密切相关。
        【注意事项】   
        1.检测标本可采用edta抗凝全血、脑脊液、咽拭子、尿液、病变组织等。
        2.标本采集时严格按无菌操作，并及时送检。
        三  rna病毒测定
        丙型肝炎病毒rna(hcv-rna)检测
        丙型肝炎病毒是一种单链正股rna病毒，引起丙型病毒性肝炎。丙型病毒性肝炎多因输血或血制品而引起，在输血者中还存在无症状的hcv携带者。
        【参考值】   
        阴性(rt-pcr，荧光定量pcr技术)
        【临床意义】   
        1.有助于hcv感染的早期诊断。
        2.hcv-rna阳性提示hcv复制活跃，传染性强。
        3.hcv-rna转阴提示hcv复制受抑，预后较好。
        4.连续观察hcv-rna，结合抗-hcv的动态变化，可作为丙肝的预后判断和干扰素等药物疗效的评价指标。
        【注意事项】   
        1.标本可用血清或血浆，用无菌注射针头抽取静脉血2～3ml于无菌肝功管或edta抗凝管中送检。避免肝素抗凝，避免反复冻融。
        2.标本室温放置不超过4小时。
        3.溶血、高胆红素标本影响检测结果。
        参 考 文 献
        [1]杨振,祁自柏,李河民.病毒基因检测技术的发展趋势. 《中国生物制品学杂志》,2006年01期.
        [2]徐丽.利用基因工程进行phb相关基因的克隆和烟草转化[d].山东师范大学,2000年.