作者：徐西林 张晓峰 孙辉 吴兴杰

    【摘要】  目的  通过活骨注射液对股骨头缺血性坏死（infh）治疗的实验研究，研究活骨注射液治疗infh的抗凝机理。方法 以日本大耳白兔为实验对象，制备股骨头坏死的动物模型，应用活骨注射液治疗，观察了活骨注射液对股骨头坏死后的血流变，血栓烷(txb2)与6酮－前列腺素f1。(6-keto-pgf1。)的影响。结果 活骨注射液能降低血液粘滞系数，抑制血小板活性，抑制血管内凝血，改善局部血运循环。结论 活骨注射液能促进股骨头坏死后局部微循环的修复。
    【关键词】  活骨注射液  股骨头缺血性坏死  抗凝  实验研究
    股骨头缺血性坏死是骨科常见疑难病之一，发病率逐渐增高。已成为国内外学者研究的热点之一。我们通过动物实验，运用纯中药制剂--活骨注射液治疗股骨头缺血性坏死对血流变血栓烷(txb2)与6酮－前列腺素f1。(6-keto-pgf1。) 的影响进行了研究，现报告如下：
    1  材料和方法
    1.1动物分组及造模：取40只日本大耳白兔，体重3.0±0.3kg，随机分四组：ⅰ组空白对照组5只，ⅱ组模型组10只，ⅲ组治疗组16只 ，ⅳ组钻孔减压组 9只。ⅱ ⅲ ⅳ组参照郭效东、王新生的方法[1]，给予醋酸泼尼松龙7.5mg／l kg，每周一次(1-12w)臀肌注射，为防止感染，给予青霉素8万单位/只，链霉索30mg／只，臀肌注射每周一次(1-12w)，ⅰ组每周一次臀肌注射生理盐水。ⅳ组在电视x线下，行髓心减压术，骨穿针为2mm的克氏针钻 至股骨头软骨下1.5mm处，术后给予无菌包扎，青链霉素抗炎。 
    1.2治疗方法：ⅱ、ⅲ组分别从第6w起给予生理盐水，活骨注射液(黑龙江中医药大学临床医学院制剂室药厂制备，10ml／支)臀肌注射，每周一次，连续注射两周。
    1.3血流变学的检测，8w时在大耳白兔上午8-9时空腹取尾静脉血5ml，肝素抗凝，于6小时内测量血流变指标：全血粘度：25℃下，用日产e型锥板粘度计测定不同切变率下的值。血浆粘度：25℃用毛细玻璃管粘度计测定。
    1.4血栓烷(txb2)与6酮－前列腺素f1 ɑ(6-keto-pgf1)的测定：用硅化注射器抽取0.1ml，2％的edta-na溶液抗凝自尾静脉快速取血5ml，立即放入硅化的离心管内离心，分离血浆，取血清1m1，并加入0.1mo1／l盐0.2m1，调节ph值3.5-4.0，加分析纯重蒸馏乙酸乙酯5m1，充分混匀后离心，提取样品后台并提取液以无油气体压缩机抽干，以lmlpbs溶解后加重蒸石油醚5ml提取一次，去脂化样品，取水待测。样品测定，及计算方法均按药盒说明书进行，用fm j82型液体闪烁计数器作放射性测定。
    1.5统计方法  以上各组数据均以均值±标准差(x-±s)表示，各组间行方差齐性检验。方差齐行norman kerls组间比较，方差不齐行秩和检验。
    2  结果
    2.1血流变学的测量
    治疗组各种切变值的全血粘度与血浆粘度与模型组比较均有显著性差异（p<0.05）而与空白组无显著差异p>0.05，说明活骨注射液能有效降低血液粘滞，减少血栓形成和降低凝血功能。

    △  与ⅰ比较显著差异  p<0.05
    *   与ⅱ、ⅳ组比较有显著差异  p<0.05
    #  与ⅰ比较无显著差异  p>0.05
    2.2血栓烷(txb2)与6酮－前列腺素f1。(6-keto-pgf1。)的检测
模型组与空白组对比txb2有显著升高（p<0.01），而6-keto-pgf1 ɑ则显著降低（p<0.01），说明股骨头缺血性坏死时确实有毛细血管内皮损伤和血小管凝聚性增强，而使血栓形成的作用，使用活骨注射液治疗2周后，治疗组较模型组有显著差异（p<0.01），而接近空白组（p>0.05），说明活骨注射液能够保护血管内皮细胞，抑制血小板活化，从而抑制血管内凝血的作用。这些有助于改善股骨头处的血运与微循环瘀滞的状况。

    △  与ⅰ比较无显著差异  p>0.05

    *   与ⅱ、ⅳ组比较有显著差异  p<0.01
    #  与ⅰ比较有显著差异  p<0.01
    3  讨论
    股骨头缺血性坏死是骨科的常见病、疑难病，发病率有逐年上升的趋势，且致残率极高。其病因复杂，主要分创伤性和非创伤两大类，其病理过程为在不同病因作用下引起股骨头血液循环障碍、栓塞，骨细胞失养，导致骨的有活力成分（骨细胞、骨髓造血细胞和脂肪细胞）变性死亡。目前观点认为股骨头坏死是与该处微循环瘀滞与毛细血管末端及小静脉内血栓形成有关[2,3]：①股骨头内血管在软骨下平面垂直走行并扩延为血窦，然后转折180°终止于静脉，血液在该处易流动缓慢；②股骨头坏死病人多有血液粘滞性增高；③激素引起的高脂血症可损伤血管内皮，诱发凝血。祖国医学认为，股骨头坏死无论什么病因，“瘀”都是其发病根本，股骨头血运不畅，气滞血瘀，不通则痛，而致痹痛，股骨头失于濡养，而致股骨头坏死。因此根据传统理论和现代医学研究，改善髋关节局部血运、促进坏死区骨细胞再生，将有效控制、治疗股骨头缺血性坏死。
    血液流变异常势必影响股骨头的局部血运，是导致股骨头坏死的重要原因之一。血栓烷（txb2）是txa2的稳定代谢产物。它由血小板产生txa2除有很强的血小板凝聚作用，还能引起血管强烈收缩, 可加速血栓性疾病的病程[4]。6-keto-pgf1 ɑ是pgi2的稳定代谢产物。pgi2由血管内皮细胞分泌具有很强抑制血小板凝聚作用和抑制血管收缩作用，此外还有保护细胞免受氧自由基白介素伤害的作用。正常情况下：pgi2与txa2之间保持平衡，使血小板不至凝聚，当血管内皮受损时一方面pgi2产生减少，另一方面可激活血小板使txa2之间比例失衡，血栓形成。可见txb2与6-keto-pgf1 ɑ是反映血管内凝血、血栓形成相当敏感的指标[4]。
    活骨注射液主要成分有丹参、川芎等组成。丹参具有活血通经，凉血消肿之功效，其化学成分有脂溶性的二萜醌和水溶性酚性两大类，具有降低血小板粘附性和抑制血小板的聚集，减少血栓形成和降低凝血功能的作用。同时，对损伤细胞的修复也有一定的作用,目前，丹参缓释体植入取得良好的效果[5]过配伍制成注射液后能够明显地延迟或阻止股骨头坏死早期的病理过程，并能有效地促进股骨头坏死后骨细胞及局部微循环的修复。川芎所含主要有效成分为川芎嗪和阿魏酸等。江中潮等[6]研究应用川芎嗪骨内注射的方法治疗股骨头缺血性坏死取得较好疗效。复方丹参及川芎嗪[7]能促进txb2水平的下降及6-keto-pgf1 ɑ水平的上升。
    实验结果表明：活骨注射液能够保护血管内皮细胞，抑制血小板活化，从而抑制血管内凝血的作用。这些有助于改善股骨头处的血运与微循环瘀滞的状况。
参 考 文 献
[1] 贺西京等，肾上腺糖皮质激素引起股骨头缺血性坏死的机制实验研究，中华骨科杂志，1992，（12）6：141.
[2] 丁坦法思著，廖福龙，翁维良译．血液流变学在诊断及预防医学中的应用[ｍ]．北京：科学技术出版．1981，33-36．
[3] jones jp jr. intravascular coagulation and osteonecrosis. clin orthop, 1992, 277:41-43.
[4] 孙建玲，张一梅，刘大娟，等.实验性大鼠肺血栓栓塞前后血浆txa2，pgi2和t/p变化及意义.中国伤残医学，2007，15(3):7-8.
[5] 黄相杰，姜红江，谭远超等.cpc／丹参缓释体植入治疗早中期股骨头缺血性坏死临床观察 .中医正骨.2007，19（1）：1-3.
[6] 江中潮，钟磊，邓友章，等. 川芎嗪骨内注射治疗股骨头缺血性坏死30例43髋疗效分析.成都中医药大学学报, 2000,23(4):43.
[7] 陆军,周易谦,催爱东,等.复方参及川芎嗪对肾病综合征高凝状态血栓烷素b26-酮-前列腺素f12的影响[j].中西医结合实用临床急救.1995,2(5):193.