作者：王艳俊 程万宏 隗玉川

【摘要】目的  研究livin基因在nsclc中的表达和临床病理意义。方法  rt-pcr技术检测45例nsclc组织中livin mrna的表达情况。结果  45例nsclc组织中livin mrna阳性表达阳性率为71.1％。livin基因表达与细胞学类型、分化程度、淋巴结转移及tnm分期均无相关（p>0.05）。结论  livin mrna在nsclc组织中高表达。
【关键词】非小细胞肺癌  livin基因
        细胞凋亡是体内清除衰老、退化和受损细胞的一个重要途径，一旦凋亡过程受到抑制，使基因发生突变的细胞得以生存和增殖，最终会导致肿瘤的发生[1]。目前关于livin在肺癌中表达情况的报道甚少，为此，本实验采用逆转录聚合酶链反应（rt-pcr）技术检测45例非小细胞肺癌组织（nsclc）中livin mrna的表达情况，探讨livin mrna表达的差异性在非小细胞肺癌中的作用。
        1  实验材料与方法
        1.1病例资料及组织标本  45例nsclc患者均为原发性肺癌，术前未接受过化疗或放疗治疗，术后均经病理学确诊，其中男31例，女14例，年龄22～75岁，平均48.5岁。对肺癌患者依据1997年新的修订标准进行tnm分期，其中ⅰ期26例，ⅱ期6例，ⅲ期10例，ⅳ期3例。病理形态学分型：鳞癌19例，腺癌21例，大细胞癌5例。组织分化程度：低分化癌32例；中、高分化癌13例。
        1.2实验方法 rt-pcr 上游引物，5′-catgggtctc
        cgtcctcg-3′；下游引物，5′-cagggagcccactct
        cgt-3′。逆转录扩增反应条件：95℃ 2min变性；95℃ 1min,58℃ 1min,72℃ 1min,30个循环；最后72℃延伸7min。
        1.3统计学处理  应用spss12.0软件进行统计分析，两样本率的比较用x2检验。
        2  结果
        rt-pcr检测nsclc组织livin mrna表达情况。
        45例nsclc组织中livin mrna阳性表达阳性率为71.1％。

鳞癌19例，腺癌21例，大细胞癌5例，livin mrna的阳性表达率分别为68.42%、71.42%和4/5（大细胞癌例数少于10例不计算百分比），差异无显著性（p>0.05）。低分化、未分化癌32例，livin mrna的阳性表达率为75.00%；中、高分化癌13例，livin mrna的阳性表达率为61.54%,差异无显著性（p>0.05）。淋巴结转移阴性35例，阴性10例，livin mrna的阳性表达率分别为68.57%和80.00%,差异无显著性（p>0.05）。tnm分期中ⅰ期～ⅱ期32例，ⅲ期～ⅳ期13例，livin mrna的阳性表达率分别为68.75%和76.92%,差异无显著性（p>0.05）。
        3  讨论
        人类的livin基因定位与染色体20q13.3,全长为1297nt。胞浆中的livin以丝状形式存在，它含有一个杆状病毒凋亡抑制蛋白重复序列（bir）分子和一个羧基端环指结构域（ring）,ring结构域不参与抑制细胞凋亡作用，但对livin在细胞内的合理分布具有重要的作用。livin的bir功能区是其发挥抗凋亡活性的必须结构[2]。
        ashhab等[3]用rt-pcr检测发现livin在肿瘤细胞系中普遍表达。然而，国内外有关肺癌患者livin表达情况及其与肺癌发生、发展﹑治疗和预后的报道甚少。本实验采用逆转录聚合酶链反应（rt-pcr）技术检测45例非小细胞肺癌组织（nsclc）中livin mrna的表达情况。结果显示：45例nsclc组织中livin mrna表达阳性率为71.1％。livin mrna的表达与肺癌患者的病理分型﹑肿瘤分化程度﹑淋巴结转移及tnm分期均无明显相关关系。
        由于livinα和livinβ两种亚型结构上的差异，体外研究发现它们也表现出不同的抗凋亡活性。livinβ亚型发挥抗凋亡功能，livinα促凋亡作用，推测两种亚型的不同表现可能与β亚型在bir结构域及ring结构域间缺少18个氨基酸有关[4]。这需要对livin在体内抑制细胞凋亡的机制以及两种亚型（livinα，livinβ）进行深入的研究。 
参 考 文 献
[1]vax dl, korsmeyer sj. cell death in development.cell, 1999,96:245-254.
[2]deveraux gl, reed jc. iap family proteins suppressors of apoptosis. genes dev,1999,13:239-252.
[3]gazzaniga p, gradilone a, giuliani l et al. expression and prognostic significane of livin, survivin and other apotosis-relateded genes in the progression of superficial bladder cancer. ann oncol, 2003,14(1):85-90.
[4]tanaka k, iwamoto s, gon g,etal. expression of surviving and its relationship to loss of apoptosis in breast carcinomas. clin cancer res,2000,6:127-134.